安全检测指导书

食品安全全检测实验指导书食品工程程教研室室目 录实验一 食品品中铅的的测定 ……………………………….3实验二 食品中中三梨酸酸、苯甲甲酸的测测定…………………………………66实验三 食品中中亚硝酸酸盐的测测定…………………………………………8实验四 食品品中漂白白剂的测测定（蒸蒸馏法）…………………………10实验一 食品中中铅的测测定一、实验验目的：：了解食食品中铅铅含量测测定的原原理；掌掌握食品品中铅的的测定方方法二、实验验原理：：试样经酸酸消解后后，导入入原子吸吸收分光光光度计计石墨炉炉中，电电热原子子化后吸吸收2883.33 n m共振振线，在在一定浓浓度范围围，其吸吸收值与与铅含量量成正比比，与标标准系列列比较定定量三、试剂剂与仪器器:3.1 硝酸3.2 过硫酸酸铵3.3 过氧化化氢(330%))3.4 高氯酸酸3.5 硝酸(11+1)):取50mmL硝酸酸慢慢加加人500mL水水中3.6 硝酸(00.5 moll/1..):取取3.22mL硝硝酸加人人50mmL水中中，稀释释至1000mLL.3.7 硝酸(11 mool/LL):取取6.44mL硝硝酸加人人50mmL水中中，稀释释至1000mLL,3.8 磷酸铵铵溶液((20ggg/LL):称取取2.00 g 磷酸铵铵，以水水溶解稀稀释1000mLL.3.9 混合酸酸:硝酸+高氯酸酸(4++1)。

取取4份硝酸酸与1份高氯氯酸混合合3.100 铅标标准储备备液:准确称称取1..0000g 金金属铅((99..99%%)，分次次加少量量硝酸((1+11)，加加热溶解解，总量量不超过过37mmL，移移人10000mm L容容量瓶，加加水至刻刻度，混混匀此此溶液每每毫升含含1.00 m g铅3.111 铅标标准使用用液:每次吸吸取铅标标准储备备液1..0mLL于1000mL容容量瓶中中，加硝硝酸(00.5 moll/L))或硝酸酸(1mmol//L)至至刻度如如此经多多次稀释释成每毫毫升含量量为100.0，220.00，400.0，660.00，800.0nng铅的的标准使使用液 仪器::所用玻璃璃仪器均均需以硝硝酸(11+5))浸泡过过夜，用用水反复复冲洗，最最后用去去离子水水冲冼干干净原子吸收收分光光光度计((附石墨墨炉及铅铅空心阴阴极灯))马弗炉、干干燥恒温温箱、瓷瓷坩埚、压压力消解解器、压压力消解解罐可可调式电电热板、可可调式电电炉四、实验验步骤：：试样预处处理4.1 在采样样和制备备过程中中，应注注意不使使试样污污染4.1..2 粮粮食、豆豆类去杂杂物后，磨磨碎，过过20目筛筛，储于于塑料瓶瓶中，保保存备用用。

4.1..3 蔬蔬菜、水水果、鱼鱼类、肉肉类及蛋蛋类等水水分含量量高的鲜鲜样，用用食品加加工机或或匀浆机机打成匀匀浆，储储于塑料料瓶中，保保存备用用4.2试试样消解解湿式消解解法:称取试试样1..00gg -55.000g 于于凯式烧烧瓶中，放放数粒玻玻璃珠加加10mmL混合合酸，加加盖浸泡泡过夜，加加一小漏漏斗电炉炉上消解解，若变变棕黑色色，再加加混合酸酸，直至至冒白烟烟，消化化液呈无无色透明明或略带带黄色，放放冷用滴滴管将试试样消化化液洗入入或过滤滤入(视消化化后试样样的盐分分而定))10 mL--25mmL容量量瓶中，用用水少量量多次洗洗涤凯式式烧瓶，洗洗液合并并于容量量瓶中并并定容至至刻度，混混匀备用用;同时作作试剂空空白4.3 测定4.3.. 1 仪器条条件:根据各各自仪器器性能调调至最佳佳状态参参考条件件为波长长2833. 33 nmm,狭缝缝0.22 nmm-1..0nmm，灯电电流5mmA-77mA，干干燥温度度1200℃,200s；灰灰化温度度4500℃，持续续15ss-200s，原原子化温温度17700''C-223000℃，持续续4s--5s，背背景校正正为氘灯灯或塞曼曼效应。

4.3..2 标标准曲线线绘制::吸取上上面配制制的铅标标准使用用液100.0,,20..0,440.00,600.0,,80..0 nng/mmL(或或Rg//L)各各10µL，注入入石墨炉炉，测得得其吸光光值并求求得吸光光值与浓浓度关系系的一元元线性回回归方程程4.3..3 试试样测定定:分别吸吸取样液液和试剂剂空白液液各100µL，注人人石墨炉炉，测得得其吸光光值，代代入标准准系列的的一元线线性回归归方程中中求得样样液中铅铅含量4.3..4 基基体改进进剂的使使用:对有干干扰试样样，则注注人适量量的基体体改进剂剂磷酸二二氢铵溶溶液(220 gg/L))一般为为5µL或与试试样同量量消除干干扰绘绘制铅标标准曲线线时也要要加入与与试样测测定时等等量的基基体改进进剂磷酸酸二氢铵铵溶液五、数据据记录与与 结果果计算：：试样中铅铅含量按按式(11)进行行计算X=(CC 一C0) xx v x 110000/m xx 10000((1)式中:X—试样样中铅含含量，单单位为微微克每千千克或微微克每升升(µg/kgg或µL gg/L)) ;C, 测测定样液液中铅含含量，单单位为纳纳克每毫毫升(nng/mmL) ；Co—空空白液中中铅含量量，单位位为纳克克每毫升升(ngg/mLL) ；；V一一试试样消化化液定量量总体积积，单位位为毫升升(mLL)；m—试样样质量或或体积，单单位为克克或毫升升(9或mL)) ；计算结果果保留两两位有效效数字。

精密度在重复性性条件下下获得的的两次独独立测定定结果的的绝对差差值不得得超过算算术平均均值的220%,,六、结果果分析与与问题讨讨论实验二 食食品中苯苯甲酸、山山梨酸含含量的测测定 薄薄层色谱谱法一、实验验目的：：掌握薄薄层分析析的原理理和方法法利用用薄层法法测定苯苯甲酸、山山梨酸在在食品中中的含量量二、实验验原理：：样品酸化化后，用用乙醚提提取苯甲甲酸、山山梨酸将将样品提提取液浓浓缩，点点于聚酞酞胺薄层层板上，展展开显显色后，根根据薄层层板上苯苯甲酸、山山梨酸的的比移值值，与标标准比较较定性，并并可进行行概略定定量三、仪器器与试剂剂：仪器：吹风机、层层析缸、玻玻璃板::10ccm×18ccm、微微量注射射器:110；1100µµL、喷雾器器试剂：异异丙醉、正正丁醇、石石油醚::沸程为为30--60''C、乙乙醚:（不含含过氧化化物）、氨氨水、无无水乙醇醇、聚酰酰胺粉::2000目、盐盐酸(11+1)):取1000 mll盐酸，加加水稀释释至2000 mmL、氯氯化钠酸酸性溶液液(400 g//L)：：于氯化化钠溶液液(400 g//L)中中加少量量盐酸((1+11)酸化化、展开开剂：正正丁醇++氨水+无水乙乙醇(77+1++2)、异异丙醇++氨水+无水乙乙醇(77+1++2)、山梨酸酸标准溶溶液:准确称称取；00.20000gg山梨酸酸用少量量乙醇溶溶解后移移入1000mLL容量瓶瓶中，并并稀释至至刻度，此此溶液每每毫升相相当于22.0 mg山山梨酸、苯甲酸标准溶液:准确称取0.2000g苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于2.0mg苯甲酸。

显色剂::澳甲酚酚紫一乙乙醇(550%))溶液(00.4 g //L)，用用氢氧化化钠溶液液(4gg /LL)调至至pH=88,四：操作作方法：：样品提取取：称取 22.500 g 事先混混合均匀匀的样品品，置于于25mm L带带塞量筒筒中，加加0.55 m L盐酸酸(1十1)酸化化，用115，10 ml乙乙醚提取取两次，每每次振摇摇1miin，将将上层醚醚提取液液吸入另另一个225 mmL带塞塞量筒中中，合并并乙醚提提取液，用用3 mml氯化化钠酸性性溶液((40gg/L))洗涤两两次，静静止155 miin，用用滴管将将乙醚层层通过无无水硫酸酸钠滤入入25mmL容量量瓶中加加乙醚至至刻度，混混匀，吸吸取100.0mmL乙醚醚提取液液分两次次置于110mLL带塞离离心管中中，在约约40℃的水浴浴上挥干干，加入入0.110mLL乙醇溶溶解残液液，备用用测定：聚酞胺粉粉板的制制备：称称取1..6 gg 聚酞酞胺粉，加加0.44 g 可溶性性淀粉，加加约7mm L水水，研磨磨3-55minn,立即即倒人涂涂布器内内制成110 ccm×18cc m,,厚度3 mm m的的薄层板板两块，室室温干燥燥后，于于80℃干燥1hh，取出出。

置于于干燥器器中保存存点样：在在薄层板板下端22cm的的基线上上，用微微量注射射器点11µL,2µL样品品液，同同时各点点1µL,2µL山梨梨酸、苯苯甲酸标标准溶液液展开与显显色：将将点样后后的薄层层板放人人预先盛盛有展开开剂槽内内，展开开剂槽周周围贴有有滤纸，待待溶剂前前沿上展展至100 cmm，取出出挥干，喷喷显色剂剂，斑点点成黄色色背景为为蓝色样样品中所所含山梨梨酸、苯苯甲酸的的量与标标准斑点点比较定定量（山山梨酸、苯苯甲酸的的比移值值依次为为0.882，00.733）五、计算算：X=实验三 香肠肠中亚硝硝酸盐测测定一、实验验的目的的：掌握握分光光光度计的的原理及及其使用用方法学学会用分分光光度度法测定定食品中中亚硝酸酸盐的含含量二、实验验原理：：样品经沉沉淀蛋白白质、除除去脂肪肪后，在在弱酸条条件下亚亚硝酸盐盐与对氨氨基苯磺磺酸重氮氮化后，再再与N--1-萘萘基乙二二胺偶合合形成紫紫红色染染料，与与标准比比较定量量三、仪器器与试剂剂与材料料：仪器： 小型型粉碎机机； 7721分分光光度度计；万万分之一一天平；；水浴锅锅等试剂：（1） 氯化铵铵缓冲液液：1LL容量瓶瓶中加入入5000mL水水，准确确加入220.00mL盐盐酸，振振荡混匀匀，准确确加入550mLL氢氧化化铵，用用水稀释释至刻度度。

必要要时用稀稀盐和稀稀氢氧化化铵调试试至pHH9.66~9..72） 硫酸酸锌溶液液（0..42mmol//L）：：称取1120gg（ZaaSO44·7H22O用水水溶解，稀稀释至11L3） 氢氧氧化钠溶溶液（220g//L）：：称取220g氢氢氧化钠钠用水溶溶解，稀稀释至11L4） 对氨氨基苯磺磺酸溶液液：称取取10gg对氨基基苯磺酸酸，溶于于7000mL水水和3000mLL冰乙酸酸中，置置棕色瓶瓶中混匀匀，室温温保存5） N--1-萘萘基乙二二胺溶液液（1gg/L）：：称取00.1ggN-11-萘基基乙二胺胺，加660%乙乙酸溶解解并稀释释至1000mLL，混匀匀后，置置棕色瓶瓶中，在在冰箱中中保存，一一周内稳稳定6） 显色色剂：临临用前将将N-11-萘基基乙二胺胺溶液（11g/LL）和对对氨基苯苯磺酸溶溶液等体体积混合合7） 亚硝硝酸钠标标准溶液液：准确确称取2250..0mgg于硅胶胶干燥中中干燥224h的的亚硝酸酸钠，加加水溶解解移入5500mmL容量量瓶中，加加10mmL氯化化铵缓冲冲液，加加水稀至至刻度，混混匀，在在4℃避光保保存此此溶液每每毫升相相当于5500μμg的亚亚硝酸钠钠。

8） 亚硝硝酸钠标标准使用用液：临临用前，吸吸取亚硝硝酸钠标标准溶液液0.550mLL，置于于50mmL容量量瓶中，加加水稀释释至刻度度，此溶溶液每毫毫升相当当于5..0μg亚硝硝酸钠四、操作作步骤：：1） 样品处处理：称取约110.000g（粮粮食取55g）经经绞碎混混匀样品品，置于于打碎机机，加330mLL水和66mL氢氢氧化钠钠溶液（220g//L），混混匀，用用稀盐酸酸调样品品pH==8.00定量转转移至1100mmL容量量瓶中加加10mmL硫酸酸锌溶液液，混匀匀，如不不产生白白色沉淀淀，再补补加2~~5mLL氢氧化化钠，混混匀置置60℃℃水浴中中加热110miin，取取出后冷冷至室温温，加水水至刻度度，混匀匀放置置0.55h，用用滤纸过过滤，弃弃去初滤滤液200mL，收收集滤液液备用2 ） 测定（1） 亚硝酸酸盐标准准曲线的的制备：：吸取00.000； 11.000；2..00；；3.000；44.000；5..00mmL亚硝硝酸钠标标准使用用液（相相当于00.0；； 5..0；110.00；5..0；220.00；255.0μμg亚硝硝酸钠），分分别置于于25mmL带塞塞比色管管中。

于于标准管管中分别别加入44.500 mLL氯化铵铵缓冲液液，加22.5 0mLL60%%乙酸后后立即加加入5..00 mL显显色剂，加加水至刻刻度，混混匀，在在暗处静静置255minn，用11cm比比色杯（灵灵敏度低低时可换换2cmm比色杯杯），以以零管调调节零点点，于波波长5550nmm处测吸吸光度，绘绘制标准准曲线低含量样样品以制制备低含含量标准准曲线计计算，标标准系列列为：吸吸取0,,00；；0.440；00.800；1..20；；1.660；22.000mL亚亚硝钠标标准使用用液（相相当于00.0；；2.00；4..0；66.0；；8.00；100.0μμg亚硝硝酸钠）2) 样品品测定：：吸取110.000mLL（或更更合适的的量）上上述滤液液（4..1）于于25mmL带塞塞比色管管中，自自4.22.1“于标准准管中分分别加入入4.550mLL氯化铵铵缓冲液液”起依法法操作同同时做试试剂空白白5、计算算X——样样品中亚亚硝酸盐盐的含量量，mgg/kgg; m1———样品品质量，gg； m2———测定定用样液液中亚硝硝酸盐的的质量，μg；V1———样品处处理液总总体积，mmLV2———测定用用样液体体积，mmL；6、思考考题：1）标准准曲线的的求作过过程中应应注意哪哪些事项项？2）紫外外可见分分光度计计的结构构如何？？其测定定原理是是什么？？实验四 食品品中漂白白剂的测测定（蒸蒸馏法）1、实验验目的：：进一步步认识二二氧化硫硫及亚硫硫酸盐在在食品中中用途，掌掌握其测测定方法法。

2、实验验原理：： 在密密闭容器器中对样样品进心心行酸化化并加热热蒸馏，以以释放出出其中的的二氧化化硫，释释放物用用乙酸铅铅溶液吸吸收吸吸收后用用浓盐酸酸酸化，再再以碘标标准溶液液滴定，根根据所消消耗的碘碘标准溶溶液量计计算出样样品中的的二氧化化硫含量量本法法适应于于色酒及及葡萄糖糖浆、果果脯3、 仪器与试试剂：仪器：电电炉；全全玻璃蒸蒸馏器 ； 3000mL三三角瓶；； 微微量棕色色酸式滴滴定管试剂：（1）盐盐酸（11+1）；； （2）乙乙酸铅溶溶液（220g//L）：：（3）碘碘标准溶溶液[cc(1//2I22)=00.011moll/L]]：将碘碘标准溶溶液（00.1mmol//L）用用水稀释释10倍倍4）淀淀粉指示示液（110g//L）：：称取11g可容容性淀粉粉，用少少许水调调成糊状状，缓缓缓亲倾入入1000mL沸沸水中，随随加随搅搅拌，煮煮沸2mmin，放放冷，备备用，此此溶液应应临用时时新制材料：红红葡萄酒酒等4、分析析步骤：：4.1、样样品处理理：固体体样品用用刀切或或剪刀剪剪成碎末末后混匀匀，称取取约5..00gg均匀样样品（样样品量可可视含量量高低而而定）。

液液体样品品可直接接吸取55.000～100.000mL样样品，置置于圆底底蒸馏烧烧瓶中4.2、测测定：44.2..1：蒸蒸馏：将将称好的的样品置置入圆底底烧瓶中中，加入入2500mL水水，装上上冷装置置，冷凝凝管下端端应插入入三角瓶瓶中的225mLL乙酸铅铅（200g/ll）吸收收液中，然然后在蒸蒸馏瓶中中加入110mLL盐酸（11＋1），立立即盖塞塞，加热热蒸馏当当三角瓶瓶中溶液液约2000mLL时，使使冷凝管管下端离离开液面面，再蒸蒸馏1mmin用用少量蒸蒸馏水冲冲洗插入入乙酸铅铅溶液的的装置部部分在在检测样样品的同同时要做做空白试试验4.2..2滴定定：向取取下的三三角瓶中中依次加加入100mL浓浓盐酸、11mL淀淀粉指示示液（110g//L）摇摇匀之后后用碘标标准滴定定溶液（00.011moll/L）滴滴定至变变蓝且在在30ss内不褪褪色为止止5、计算算： X＝＝式中：XX——样品品中的二二氧化硫硫总含量量，g//kg；；A2———滴定样样品所用用碘标准准滴定溶溶液（00.011moll/L）的的体积，mmL；B——滴滴定试剂剂空白所所用碘标标准溶液液（0..01mmol//L）的的体积，mmL；m2———样品的的质量，gg；0.0332———与1mmL碘标标准溶液液相当的的二样化化硫的质质量，gg。

6、在蒸蒸馏时请请自行完完成碘液液的标定定7、思考考题：淀淀粉指示示剂过早早和过迟迟加入有有何影响响？13。