实训三雌犬、猫的发情鉴定

实验实训三犬、猫的发情鉴定【技能目标】让学生通过实践操作，能根据犬猫发情周期各方面的表现和各种手段，能确定犬猫所处的发情阶段、确定排卵时间和配种时间教学资源】1. 动物：达到性成熟后的公犬、猫和母犬、猫若干只.2. 器械：阴道开张器、手电筒、手术剪子、镊子、注射器、保定架、保定绳、脱脂棉、水盆、毛巾等3. 药品：75%酒精、1-2%来苏儿溶液、01%新洁尔灭溶液、液体石蜡油、洗涤剂等【原理与知识】根据母犬、母猫的发情表现，选用合适的仪器和方法确定发情所处的阶段，并确定输精时间.【操作方法】〔一）外部观察法1、 通过对犬、猫发情鉴定的理论讲授，要求学生熟记犬、猫发情时的外部表现特征犬的发情表现：发情前期母犬兴奋不安，有时不停地吠叫，善于游走，饮水量变大、排尿频繁，尤其见到公犬后频频 排尿，有些发情好的母犬会出现互相爬跨，并作出公犬样的交配动作；外阴水肿，体积增大，阴门下角悬垂 有液体；发情开始时会在阴门处流出含有大量血液的阴道分泌物发情期发情前期的表现进步加强明显，阴门水肿非常明显，由于出血量减少，阴道分泌物的颜色有红 色变成了黄色，最后变为淡黄色，有的变成了无色透明样发情后期母犬变现为安静、温顺，发情表现消失而趋向于正常，阴门水肿消失，阴门相对较小，有皱 级，张力较大，阴道仅有少量的粘液排出。

乏情期 母犬发情表现完全消失，阴门恢复发情前的大小，阴道不再排出粘液猫的发情表现：发情前期 阴门水肿不明显，阴道无血红色恶露；喜欢被抚摸，排尿频繁.发情期 雌猫嗷嗷叫，性格变得较温顺，精神振奋，食欲下降，若以手压其背部，有踏足举尾巴的动作， 尾巴弯向一侧愿意接受雄猫交配；会阴部前后移动，如果轻敲骨盆区，表现更为明显；阴门红肿、湿润，甚 至流出黏液发情后期 阴门水肿逐渐萎缩,食欲逐渐增强，不接受雄猫的爬跨2、 组织学生到犬、猫养殖场现场观察犬、猫发情时的外表征状，并做记录，从而使学生熟悉如何区别 发情犬、猫与非发情犬、猫二）试情法试情法是以母犬、母猫是否愿意接受公犬、公猫交配来鉴定发情阶段的一种方法一般情况下，处于发 情期的母犬、母猫，见到公犬、公猫后会立即表现出愿意接受交配的行为，尾巴偏向一侧，故意暴露外阴， 并出现有节律的收缩，站立不动等.试情时，最好采用输精管结扎的公犬、公猫，以免滥交3. 阴道检查法 通过阴道黏液涂片的细胞组织分析，来确定雌犬发情阶段.发情前期，阴道黏液涂片中 含有很多角质化的上皮细胞、红细胞、少量白细胞及大量碎屑;发情期含有角质化的上皮细胞和红细胞，而白 细胞不存在.排卵后，白细胞占据阴道壁，同时出现退化的上皮细胞；发情后期则含有大量白细胞、非角质 化的上皮细胞及少量的角质化上皮细胞；休情期的黏液涂片中上皮细胞是非角质化的，但到发情前期上皮细 胞变为角质化。

4. 电测法 即应用电阻表测定雌犬阴道黏液的电阻值，以便确定最合适的交配时间.发情周期中，电阻 变化大发情前期的最后1d变为495-1260 0，而在此之前为250 一 7000在发情期也发现不同变化，特 别是在发情期开始时，有些雌犬阴道黏液的电阻值下降，而有些雌犬与发情前期相比则上升但所有的雌犬， 在发情期后期的部分时间内电阻值下降［实训提示］(1) 事先推备好实习雌犬若干只，预先检查，了解每只雌犬的生理状况，是否发Q情.(2) 一个教学班应根据实习雌犬的多少，分成若干小组，轮流进行练习［作业］(1) 根据观察和检查结果，分析发情症状，确定输精或配种日期2) 雌犬发情时，有哪些特殊症状和表现？雌猫的发情鉴定［目的和要求］能够通过观察雌猫的行为、阴道变化和性欲表现来判断雌猫是否发情，掌握雌猫发情的基本要点［仪器和材料］处于不同发情周期的雌猫、生理盐水、棉签、玻璃片、显微镜、姬姆萨染料、开废器、0.1%甲苯胺蓝染 料等［实训内容］1. 外部观察法鉴定雌猫发情(1) 发情前期 阴门水肿不明显，阴道无血红色恶露；喜欢被抚摸，排尿频繁2) 发情期 雌猫嗷嗷叫，性格变得较温顺，精神振奋，食欲下降，若以手压其背部，有踏足举尾巴的动 作，尾巴弯向一侧愿意接受雄猫交配；会阴部前后移动，如果轻敲骨盆区，表现更为明显；阴门红肿、湿润， 甚至流出黏液。

3) 发情后期 阴门水肿逐渐萎缩，食欲逐渐增强，不接受雄猫的爬跨2. 阴道细胞学检查法(1) 抓住猫颈背部和尾巴将其固定住，清洗阴门及其周围；(2) 开腔器打开阴道，用浸有生理盐水的棉签伸入阴道约1. 5M深,转动棉签取样；(3) 将棉签在载玻片上滚动制片，尽量避免拖过去导致细胞扭曲；(4) 制好的片子放人姬姆萨染色液中固定，或加一滴0.1%甲苯胺蓝染色5min后，经这种染色方法染的 片子不能长久保存；(5) 在显微镜下观察结果，并分析3. 采集阴道样品中上皮细胞类型，可分为以下几类：(1) 无核细胞呈鳞状，是角质化的表皮纫胞，为嗜酸性或嗜碱性染色2) 表皮细胞多角形，核固缩，多数为嗜酸性染色3 )大中型细胞细胞呈多角形，核呈空泡状4) 小中型细胞 呈圆形或卵圆形，核较大呈空泡状.胞浆清楚，未固缩，有时可见雌性染色体的标志5) 旁基细胞呈圆形或卵圆形，胞核位于细胞中央(6) 泡沫细胞肥核呈空泡状的旁基细胞.(7) 发情后期纫脑 是侵入了许多白细胞的旁基细胞(8) 基细胞小而长，核位于基部猫发情周期可发现角质化细胞和白细胞，但发情前期无红细胞猫阴道上皮细胞的变化不能推确地反映 发倩的开始，有大约1 /3的猫在阴道上皮细胞角质化前就开始发情。

在发情期和发情后期，看不到基细胞 发情期无旁基细胞，而发情后期旁基细胞最多.在发情期，中间型细胞减少,进入发情后期时又开始增多无 核表皮细胞各期都有，发情时数目最多，而细胞核固缩的细胞从发倩前期到发情后期逐渐减少根据细胞学检查计数，可以计算表皮细胞指数(SCI)和核退化指数(NDI),用于推断猫处于发情周期哪一阶段.SCI二表皮细胞总数/表皮下细胞总数*100%表皮细胞包括有核和无核表皮细胞、大中型细胞表皮下细胞包括小中型细胞、旁基细胞和基细胞在 发情期，SCI可达70%以上，约半个月后降低NDI二表皮细胞总数/中间型细胞总数*100%NDI变化规律与SCI相似发情期阴道样品中无细胞碎片，因而抹片较清晰应该注意的是阴道细胞学变化并非与发情周期的阶段 性绝对相关一般而言，阴道细胞学变化比临床表现早出现1-3d个别猫不出现细胞学变化［实训提示］在阴道采样时，应该注意以下问题：(1)不论向阴道伸入何种采样用具，都有可能诱发排卵因此，采样时需格外小心；(2) 为了避免受前庭的污染，采样用具应先从背侧伸人，继而改向头前方；(3) 使用开腔器时不可使用润滑剂，以免干扰制片；(4) 取样时要小心，不可造成阴道损伤或样品污染诊断；(5) 制好的片子要立即固定，操作和观察时应细心。

［作业］根据以上实训方法步骤说明，叙述发情雌猫的外部观察法要点；同时根据阴道细胞学检查法中，采集样 品的不同上皮细胞类型，准确判断实验雌猫所处的发情周期，并钟L部观察法判断的结果进行比较。