移液器操作技巧

移液器操作技巧前言：移液结果会很容易受到使用技法的影响为了获得最佳结果，需要采用 良好的移液技法技巧1 : 一致性 在按压与释放定位销时，需要保持一致的节奏、速度和技法吸液速度过快会导致套柄与活塞喷溅、产生气雾以及受到污染，甚至导致样品量 损耗一致性可使准确度提高达5%技巧2 :正确填充吸头当某一吸头的建议（标称）范围为最大吸头容量（标称容量）的10%至100%时, 可在35%至100%这一较小以及优化的范围内实现最高精确度在如此小的范围内移液会减少对操作人员技法的要求， 并可将结果准确度提高约1%当达到标称容量的50%时可提供最佳结果III技巧3 :吸液时保持垂直入水角使入水角尽可能地接近垂直位置-否则垂直液柱较小，这样将会吸入过多样 品分液时，吸头应当与容器壁保持较小角度， 从而确保良好的排液效果关于分1 / 6'.2%液的更多技巧将在下一期电子快讯中提供）使用垂直位置（尤其是使用微量移液器时），可使准确度提高达2 / 6'.技巧4 :一致性千分尺设置始终从同一方向设置您的千分尺最好从高至低进行：在将容量设置从高容量减少降至低容量时，只需将表盘下调至所需容量设置提高容量设置时，转动选择轮使其略微超过所需容量，然后缓慢回调至正确设置 这可避免机械回冲。

正确设置容量可使准确度提高达 0.5%入水深度1mm2- 3mm3- 6mm6-10mm技巧5 :吸头入水深度正确的吸头入水深度对于微量移液器尤为重要如果吸头入水过深，则随着压力 的加大，吸液量将会增多保留在吸头表面的液体会影响结果如果吸头未入水 过深，则会造成空气进入，从而产生气泡以及导致容量不准确 正确的入水深度 可使准确度提高达5%移液器容量2 与 10ul20 与 100ul200 与 1000』5000ul 与 10ML技巧6 :分液技法对于大多数应用而言，建议在分液时将吸头的末端贴靠容器壁这可减少或者消 除分液后残留在吸头上的样品沿侧壁向上滑动吸头末端将移液器拆下，从而去 除吸头孔处的任何残留液滴此技法可使结果准确度提高达 1%另一种技法是直接分液到液体表面 使用诸如RAININ Fin ePoi nt吸头之类的薄 壁吸头十分重要，这是因为这些吸头允许充分排液如果直接分液至液体中，则建议进行反向模式移液，从而防止分液后吸液技巧7 :预清洗移液前至少预清洗两遍，从而补偿位于吸头内部的液体这还有助于中和毛细管 效果以及使移液器内部的空气温度等于样品温度使用正在分液的相同液体进行预清洗。

使用吸头吸液，然后将其重新分液至储罐或者废液箱预清洗可为所有等分溶液提供相同的接触表面当与水液一同使用时，两次预先冲洗可使准确度提高达 0.2%技巧8 :预清洗异常处理尽管预清洗在大多数情况下可提高准确性，但是当对非常温和或者冰冷的溶液进 行移液时，它会对结果产生不利影响不建议进行预清洗的例外情况为：-对非常冰冷的溶液（如：冰浴）进行移液-对37° C或以上的温和溶液进行移液对温和或者冰冷溶液进行预清洗有可能造成高达 5%的错误率技巧9 :恒定室温在恒定室温条件下移液移液的理想室温为 +- 21.5 ° C,此温度同样适用于校 准防止温度大幅度或者突然变化，这是因为移液器中的空气无法足够快速地适 应，以及样品量可能会受到影响在恒温条件下移液可使准确度提高达 5%HcKrmalizedt06 P^IOOO20 25 30 40丁尸k如開 CAlOOpL *50QpL ■ 1000 pL技巧10 :始终垂直存放移液器不要将移液器平放在抽屉内或者工作台上这有可能损坏套柄末端，从而造成泄 漏此外，残留液体还会流入套柄中，从而污染移液器正确储存移液器可防止 不可估量的错误以及保护仪器技巧11 :吸头入水时间在将样品吸入吸头时，在样品中的入水时间是良好移液技法中的关键因素。

在平稳松开定位销按钮之后，必须进行短暂暂停，然后再从样品中取出，以确保将全 量样品吸入吸头中如果量较大以及对于粘性物质而言， 必须在等候较长时间后 再取出，因为移液器中的气室需要一秒钟的时间才能实现均衡技巧12 :吸液速率移液器的吸液速率不尽相同，因此会对结果的精度与准确度产生影响 用户应使 用以一种平稳并且受控的方式释放移液器定位销按钮释放过快的定位销可能出 现的最常见后果是：气雾会进入移液器套柄中，从而损坏移液器的内部部件当 出现向上喷溅液体的情况时，这种现象更为明显如果液体具有腐蚀性，则有可 能损坏移液器的套柄并且会造成样品交叉污染技巧13 :反向移液模式对于科研人员而言，使用移液器对粘性与密致液体进行精准吸液与分液一直是一 道难题对策是使用反向移液模式进行样品吸液时，将定位销下按至“排液” ‘ 将所选液量和多余液体吸入吸液器吸头中 然后在分液时，将定位销只按至零位 通过此方法，在分液时液体会保持在吸头内对于生物、粘性或起泡液体而言， 反向移液可改进结果6 / 6'.。